大浦天主堂(日語:大浦天主堂/おおうらてんしゅどう Ōmura tenshudō */?),是位於日本長崎的天主教宗座聖殿,為日本在1853年結束鎖國後首批建造的教堂之一,也是日本現存的最古老的天主教建築物,目前已列為日本國寶保護,是該制度中第一個列冊保護的西式建築。其正式名稱為「日本二十六聖殉教者堂」,係為了紀念日本二十六聖人,該教堂朝向他們殉教的地點長崎市西坂。1953年(昭和28年),大浦天主堂正式定為日本國寶。2007年(平成19年)做為「長崎的教堂群與基督教相關遺產」中的一部分列入聯合國教科文組織的世界遺產評審名單。2016年(平成28年)成為日本第一座宗座聖殿。為了應對觀光客的增加,該教堂所屬的大浦教會(大浦堂區)在教堂入口石階下方的小廣場旁另建新的教堂建物,於1975年(昭和50年)啟用,以供彌撒等堂區日常運作的需求。